尊龙凯时人生就是搏z6com

          MSAP

          发布时间:2022-08-19浏览次数:3418

          甲基化敏感扩增多态性,它是在扩增片段长度多态性技术的基础上建立起来的。MSAP技术相对其他测定DNA甲基化程度技术有如下优点:

          (1)不需知道被测DNA的序列信息,在不同生物上具有通用性,可用于DNA序列背景知识未知的生物。

          (2)操作相对简便,在AFLP技术体系的基础上不需要太大改进,即可操作 。

          (3)可在全基因组范围检测CCGG位点的胞嘧啶甲基化变化 。MSAP技术的局限性在于不能完成非CCGG位点的胞嘧啶甲基化。

          MSAP的选择扩增产物目前主要通过两种方法进行分离检测,传统的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的方法和自动化程度较高的毛细管凝胶电泳(FISH)进行检测。

          PAGE方法主要是优点是引物可以是普通引物,适用于少量样本或者大量样本的引物筛选比较合适,另外还可以对差异条带进行克隆测序,获得差异条带的序列信息。

          毛细管电泳检测方法的优点是自动化,可以对大量样本进行实验,速度快 ,后期的条带读取可以依靠软件 ,降低了人为读取的标准不一。

          1)MSAP服务内容

          1 样本基因组DNA的提取

          2 筛选多态性较好的引物(酶切,预扩 ,选择性扩增)

          3-1 在ABI3730xl测序仪上完成数据采集

          3-2 或是在JY-CX2B型 测序电泳槽上完成PAGE 检测(可以回收差异带)

          数据分析:和客户详细沟通,确认分析方案:读取01矩阵,PAGE胶建议客户自己读取;

          2)客户提供:

          ★ 基因组DNA:

          ●至少15μL样品,浓度为50-100ng/μL;

          ●2%琼脂糖电泳检测有DNA主带,没有降解;

          ●DNA经过DNA纯化试剂盒或磁珠纯化;

          ●DNA需溶解在TE或灭菌的去离子水里;

          ●DNA溶解后,肉眼看不到杂色;

          ★ 植物材料: 新鲜组织,叶片采用硅胶干燥后或干冰运输;

          ★ 动物材料: 新鲜组织,无水乙醇封存低温运输;

          3)试验费用:


          MSAP 毛细管电泳检测按照96个样本进行随机8对引物计算,提供01矩阵
          项目单价数量金额
          DNA提取30962880
          引物30000
          酶切401927680
          预扩151922880
          选择性扩增10153615360
          毛细管检测8001612800
          读带、分析

          议价
          合计

          41600
          MSAP PAGE电泳检测按照25个样本进行随机8对引物计算,提供PAGE胶图
          项目单价数量金额
          DNA提取3025750
          纯化1025250
          酶切40502000
          预扩1550750
          选择性扩增104004000
          PAGE检测80086400
          读带、分析

          议价
          合计

          14150

          MSAP1

          MSAP2



          返回顶部

              XML地图